程：    

阪崎腸桿菌的測試片檢測方法

方法編號：5045

1 適用范圍：可用于各類食品和原料中阪崎腸桿菌菌的檢測以及突發(fā)事件應(yīng)急需要。

2 方法原理：測試片是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品，由阪崎腸桿菌選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異性酶顯色劑等組成，一步培養(yǎng)15～24小時就可確定出目標(biāo)菌的存在。

3操作方法

3.1樣品處理：取樣品 25 mL（g）放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，充分振搖或置均質(zhì)器中制成1:10的樣品勻液。

3.2 接種：將測試片置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固，zui后用手輕輕地壓一下。每個樣品接種2片。

3.3 培 養(yǎng)： 將測試片疊在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。

3.4 結(jié)果判別: 對測試片進行觀察，呈藍(lán)綠色的菌落為阪崎腸桿菌。對于出現(xiàn)陽性菌落的樣品，用其他方法作進一步的鑒定。

4  附加說明

4．1阪崎腸桿菌純菌株產(chǎn)生典型的藍(lán)綠色點，接種一些腸道菌如大腸桿菌、腸炎沙門氏菌等時，一加樣下去就會出現(xiàn)有紫色的點或暈狀，此為產(chǎn)品本身顯色劑的原因，不影響產(chǎn)品的使用和結(jié)果判讀；而金黃色葡萄球菌、大腸桿菌O157和副溶血性弧菌等均被抑制。

4．2 本法還可應(yīng)用于從業(yè)人員體檢、中毒樣品和物體表面的檢測，用取樣棉簽涂抹被測物體表面，放入裝有3mL滅菌生理鹽水的試管中，搖晃10s，然后取1mL接種到測試片上。

4．3注意使用過的測試片上帶有活菌，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理 。