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Dylight 熒光二抗大全手冊

來源:艾美捷科技有限公司   2013年09月25日 20:25   528

美國Abbkine的DyLight™系列熒 光標(biāo)記是一種近年來被廣泛應(yīng)用的新型熒光染料,由于具有很好的光譜寬度、更強(qiáng)的熒光強(qiáng)度,更高的光學(xué)耐受性(抗淬滅性)、對pH不敏感、分子較小而滲透性更好的優(yōu)勢,越來越受到科研客戶的喜愛。DyLight™種類齊全,如Dylight 405是藍(lán)色熒光,替代Alexa 405;DyLight 549是綠色熒光,可*替代FITC/Cy2/Alexa 488;*替代Cy3/Rhodamin/Alexa 546/Alexa 555的Dylight 549;替代Texas Red/Alexa 594的Dylight 594;Dylight 633和Dylight 649(可替代Cy5/Alexa 647)則是更強(qiáng)的紅色熒光;另外,Dylight還有適配Odyssey系統(tǒng)的近紅外和遠(yuǎn)紅外二抗Dylight 680和DyLight 800。下面我們來看看美國Abbkine品牌DyLight系列熒光的優(yōu)異表現(xiàn)吧:

 

一、DyLight熒光二抗比傳統(tǒng)熒光標(biāo)記二抗具有更高的熒光發(fā)光強(qiáng)度

 

 

 

 DyLight 488標(biāo)記的抗體比Cy2 和FITC標(biāo)記的更亮,與Alexa Fluor 488 標(biāo)記的亮度相當(dāng)。DyLight 549標(biāo)記的抗體比傳統(tǒng)的羅丹明、TRITC等熒光亮,與Cy3 和Alexa Fluor 555亮度相當(dāng);而DyLight 594標(biāo)記的抗體熒光亮度明顯強(qiáng)于Alexa 594標(biāo)記抗體。相比較Texas Red而言,不僅更亮,而且具有更好的水溶性。

 

二、DyLight熒光二抗比傳統(tǒng)熒光及Alexa標(biāo)記二抗具有更低的背景!

 

 

 

 

左上圖為使用 FACSCalibur流式細(xì)胞儀(Becton Dickinson),分析抗-CD3和其他熒光素標(biāo)記的人外周血淋巴細(xì)胞圖譜。不同顏色分別指示DyLight 488 (綠色)、FITC (黃色)、Cy2 (藍(lán)色)以及Alexa Fluor 488(紅色)標(biāo)記的熒光二抗。箭頭所指處顯示Alexa Fluor 488在這個實(shí)驗(yàn)中有輕微的背景。右上圖為在流式分析中,以抗-CD3和各種熒光素連接二抗標(biāo)記的人外周血淋巴細(xì)胞圖譜。綠色為DyLight 649、黃色為APC、藍(lán)色為Cy5 標(biāo)記的二抗。Alexa Fluor 647為紅色區(qū)域。箭頭所指處顯示Alexa Fluor 647在這個實(shí)驗(yàn)中有輕微的背景。

 

三、DyLight熒光二抗比傳統(tǒng)熒光標(biāo)記二抗具有更好的光學(xué)穩(wěn)定性、發(fā)光更持久、更適合拍照

 

 

從光穩(wěn)定性上來說,DyLight 488與Alexa 488均表現(xiàn)優(yōu)異,均強(qiáng)于FITC和Cy2;DyLight 549與Alexa 555具有相當(dāng)?shù)哪凸庑?,稍微比Cy3強(qiáng)。在封片劑中加入抗淬滅劑如ProLong Gold、VECTASHIELD或含N-propyl gallate的PBS-甘油等可增加這三種熒光染料的耐光性;在可見光譜的橙-紅區(qū)域內(nèi),DyLight 549和Cy3標(biāo)記的二抗在所有免疫熒光實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出zui大靈敏度。DyLight 594在不含有抗淬滅劑的條件下,遠(yuǎn)較Texas Red穩(wěn)定,與Alexa594相當(dāng);在含有某些抗淬滅劑的情況下,DyLight 594同樣表現(xiàn)優(yōu)異。

 

四、DyLight熒光二抗種類更多更全

從藍(lán)色的DyLight 405、綠色的DyLight 488、黃色的DyLight 549、橙色的DyLight 594到紅色的DyLight 633和DyLight 649等zui常用的熒光顏色,激發(fā)光和發(fā)射光光譜分布合理,適用于各種熒光分析。其中藍(lán)色熒光的DyLight 405適合用于綠色和紅色以外的三標(biāo)實(shí)驗(yàn)。

另外,還有兩種遠(yuǎn)紅外DyLight標(biāo)記抗體,具有更低的熒光背景干擾和更強(qiáng)的樣本穿透力,因而更適用于細(xì)胞或組織的成像等領(lǐng)域的研究。艾美捷提供的進(jìn)口DyLight抗體產(chǎn)品覆蓋各種動物種屬,包括人、小鼠、兔、大鼠等,另有3種標(biāo)記的鏈親和素。


五、DyLight熒光二抗具有zui高的性價比!

 

可能還需要考慮的一個問題是價格的問題,其實(shí)Dylight的熒光二抗與常規(guī)熒光二抗相比,具有更高的性價比,一般來說,Dylight的價格比常規(guī)二抗只高20%左右,但是Dylight的效價通常是常規(guī)熒光二抗的2-4倍左右,因此就zui終的性價比,Dylight更勝*。舉例來說,Abbkine的 FITC標(biāo)記的山羊抗小鼠IgG二抗(貨號為A22110),100μl是¥160;而相應(yīng)的Abbkine的Dylight 488標(biāo)記的山羊抗小鼠IgG二抗(貨號為A23210),100μl報價是¥240,但是在具體使用時,比如免疫熒光實(shí)驗(yàn),其推薦稀釋比率分別為 1:100和1:400,即100μl的FITC標(biāo)記山羊抗小鼠IgG二抗(貨號為A22110)zui終使用液是10ml,而100μl的Dylight 488標(biāo)記山羊抗小鼠IgG二抗(貨號為A23210)zui終使用液是40ml,可見,即使不考慮Dylight更高的熒光強(qiáng)度、更好的光學(xué)穩(wěn)定性和特異性,但就價格來說,Dylight熒光二抗也具有更高的性價比。

 

我們向您推薦美國Abbkine*的液體形式的小包裝常用DyLight熒光系列二抗產(chǎn)品,以及Immunoreagents和Jackson各種規(guī)格的全系列DyLight二抗產(chǎn)品。

 

小包裝Abbkine的DyLight熒光二抗。均提供100μl和500μl兩種包裝現(xiàn)貨產(chǎn)品。Abbkine是美國專業(yè)生產(chǎn)免疫試劑并提供細(xì)胞學(xué)研究解決方案的公司,其產(chǎn)品主要銷往到的的大學(xué)、科研院所等研究機(jī)構(gòu)。其中Abbkine為您提供 zui常用的DyLight 549熒光標(biāo)記二抗產(chǎn)品:

 

 

 

抗體描述貨號|熒光標(biāo)記

DyLight 405

400nm/421nm

DyLight 488

493nm/518nm

DyLight 549

555nm/568nm

DyLight 594

591nm/616nm

DyLight 649

652nm/670nm

Goat Anti-Mouse IgG (H+L)

A23110

A23210

A23310

A23410

A23610

Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)

A23120

A23220

A23320

A23420

A23620

Rabbit Anti-Goat IgG (H+L)

A23130

A23230

A23330

A23430

A23630

Goat Anti-Rat IgG (H+L)

A23140

A23240

A23340

A23440

A23640

Goat Anti-Human IgG (H+L)

A23150

A23250

A23350

A23450

A23650

注:每種規(guī)格均提供100μl和500μl,2013年報價分別為¥240/¥960,報價請使用貨號在內(nèi)查詢。

 

 

大包裝DyLight二抗更劃算、種類更多!

 

 

1. 大包裝二抗具有更高的性價比。以DyLight 488山羊抗小鼠二抗為例,Jackson的(貨號為115-485-003)規(guī)格為2mg,可配制成1.3ml,與Abbkine的相應(yīng)二抗相比,是其100μl包裝價格的6倍,含量卻增加了12倍!另外,由于DyLight熒光二抗本身分子量較小,同一個二抗分子上可以標(biāo)記更多的DyLight熒光物,比如與相同規(guī)格的FITC山羊抗小鼠二抗(貨號為115-095-003)相比,價格雖然增加了25%,效價卻高了100%!這還沒有考慮DyLight具有更好的抗萃滅性、靈敏度以及信噪比!

 

2. 大包裝二抗種類更齊全、應(yīng)用更廣泛。更重要的是,JacksonDyLight系列種類非常多,幾乎能滿足實(shí)驗(yàn)的各種需求,包括經(jīng)過各種血清吸附、不同種屬來源(包括驢、兔、山羊、小鼠等)、F(ab’)2Fab等不同片段化,以及特異性抗IgM/IgA或者抗FabFc等二抗產(chǎn)品。下列為部分DyLight二抗列表,更多相關(guān)產(chǎn)品及解決方案請艾美捷科技有限公司。

 

*標(biāo)有“(min X…Prot)” 字樣的抗體是經(jīng)過了圓括號中所標(biāo)的物種的IgG/或血清蛋白的吸附處理的二抗。與一個物種反應(yīng)的二抗可能與其他物種發(fā)生交叉反應(yīng),除非這類抗體經(jīng)過其他物種的吸收實(shí)驗(yàn)。而經(jīng)過了相關(guān)物種的血清蛋白吸附便可以降低與該物種的IgG的非特異性結(jié)合能力。但是需要注意的是,這種經(jīng)過針對物種吸附處理的抗體識別相近物種單抗的表位數(shù)量也減小了,其識別單抗的能力也很弱。

 

#  這種F(ab’)2片段形式的二抗是用*消化IgG去除Fc部分,剩下兩個靠二硫鍵連接的結(jié)合抗原的Fab部分,依然是二價的;該抗體可避免與Protein A /G或與Fc受體的結(jié)合, 還由于其分子本身比較好,更容易滲透入細(xì)胞組織結(jié)構(gòu)內(nèi)而靈敏度更高 。

 

更多DyLight產(chǎn)品應(yīng)用、及產(chǎn)品查詢,請艾美捷科技有限公司。如果您對上述產(chǎn)品感興趣,請致電* 轉(zhuǎn)801/802/803  或者/4876 到艾美捷科技有限 公司垂詢相關(guān)的產(chǎn)品信息及完整實(shí)驗(yàn)解決方案

 

 

武漢艾美捷科技有限公司
WuHan AmyJet Scientific Inc.

 

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111-1-7A MingDu HuaYuan, 450 XiongChu Road, HongShan District, WuHan, HuBei, China

 

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