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體視顯微鏡沒有DIC、偏光、相差等觀察方法,而是通過多種照明方式來實(shí)現(xiàn)不同的觀察,照明方式對于成像具有戰(zhàn)略性的意義。體視顯微鏡的照明方式主要分為透射照明和落射照明兩種。根據(jù)不同的樣品,這兩種照明方式也有不同的配置。對于同一個樣品,盡管有不同的照明方式,但經(jīng)過實(shí)際操作會發(fā)現(xiàn)其中某一種可能會得到的觀察結(jié)果。
一、透射照明
透射照明又可以分為:普通透射照明、夾縫透射照明和透射斜照明。一般用于觀察透明的標(biāo)本,比如卵細(xì)胞、胚胎發(fā)育等。光線從底座自下而上照射,透過樣品,實(shí)現(xiàn)觀察。
上面第二、三圖是功能比較齊全的透射照明底座,這種的透射底座配備的是冷光源(通過光纖傳導(dǎo)光,燈泡不直接照射樣品,燈泡發(fā)的熱量不會傳導(dǎo)到樣本上,明顯降低了樣品表面的受熱程度,所以叫冷光源)。這種照明底座能提供明亮、有效的照明,對比度可以進(jìn)行連續(xù)調(diào)節(jié),具備可調(diào)節(jié)的細(xì)長狹縫,能增加各種樣品的對比度,可通過內(nèi)置濾色片滑板調(diào)節(jié)亮度和色溫。
低檔的體視顯微鏡一般不用冷光源,而是在底座上直接安裝一個鹵素?zé)簟_@樣的光源如果長期工作,會使得照明底座發(fā)熱,有燙手的感覺。這種輻射導(dǎo)致樣品表面的熱量增加,可能會傷害活的生物樣品,也會使一些材料樣品變形、融化。所以觀察熱敏感的樣品時,燈泡的位置需要離樣品遠(yuǎn)一些,或使用輻射較小的光源。
二、落射照明
落射照明一般用于不透明樣品的觀察,如礦石、昆蟲、電路板等等。落射照明種類有:光纖落射照明、環(huán)形光照明、同軸落射照明,以及熒光照明(這里不做介紹)。
1. 光纖落射照明
光纖落射照明有單光纖照明和雙光纖照明之分。這類光源的特點(diǎn)是安裝簡單靈活,可以任意調(diào)節(jié)照明的角度。照明角度顯著影響樣品的成像效果。根據(jù)樣品的本質(zhì)特征,調(diào)節(jié)照明角度,依靠經(jīng)驗(yàn)找到*的光源位置。常用于觀察昆蟲、礦石樣品等。
其缺點(diǎn)是:照明始終存在死角,而且因?yàn)槭切闭彰鳎钥赡軙嘘幱啊?/span>
2. 環(huán)形光照明
環(huán)形光照明是在物鏡上面直接安裝一個環(huán)形燈(熒光燈光,或者LED),這樣就可以垂直照射樣品,解決了斜照明不能垂直照明的問題。保證持續(xù)穩(wěn)定的照明,可重復(fù)性高。常用于動物*和解剖實(shí)驗(yàn)。
但是環(huán)形光照明也存在一個問題就是對于中心的照明不夠明亮,整個視野照明不夠均勻。所以繼而又有同軸落射照明的推出。
3. 同軸落射照明
同軸落射照明,是在顯微鏡的內(nèi)部加裝照明光路,照明光路在顯微鏡的光軸里,與顯微鏡光路平行,照明光經(jīng)過物鏡來照射樣品。這樣可以實(shí)現(xiàn)超大視野的攝像范圍,且亮度均勻、畫面清晰。在對晶圓片、液晶等圖形樣品的辨認(rèn)或者瑕疵檢查、對各種尺寸芯片的測量方面,同軸落射照明表現(xiàn)。
總之,體視顯微鏡的照明裝置要根據(jù)自己的實(shí)際樣品來決定,透光的樣品要用透射照明,不透明的用落射照明。如果沒有先例可循,可根據(jù)實(shí)際觀察效果再做決定。
這里沒有細(xì)談體視熒光光源,使用用戶比較少,等以后有時間再談。
水平有限,有些地方介紹的不夠詳細(xì),請大家補(bǔ)充,謝謝!
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