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分光光度計(jì)有哪些限制性條件？

來源：上海奧析科學(xué)儀器有限公司 2024年10月10日 08:47 41

分光光度計(jì)就是利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器。該儀器是實(shí)驗(yàn)室、科研機(jī)構(gòu)、醫(yī)療、農(nóng)業(yè)、食品廠、飲用水廠等機(jī)構(gòu)檢驗(yàn)設(shè)備。已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于核酸，蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。

　　分光光度計(jì)的限制性條件主要表現(xiàn)為；通過溶液的光必須是平行的；通過溶液的光必須是單色光；待測(cè)溶液必須是純凈的、均勻的且濃度不宜過高，這是瑯伯-比爾定律首要的三個(gè)前提條件。

　　但是在實(shí)際的分光光度計(jì)的制造和使用過程中這三個(gè)條件是不可能達(dá)到的。其一：因?yàn)楣馐侵本€傳播的，在分光光度計(jì)制造過程中，燈源發(fā)出的光是發(fā)散的，經(jīng)過聚焦鏡進(jìn)行聚焦等直到經(jīng)過溶液的整體過程中，光是不可能平行的。其二：燈源發(fā)出的光是復(fù)合光，經(jīng)過狹縫，再經(jīng)過光柵分光等步驟，因?yàn)槭艿姜M縫和光柵本身的限制，光柵分光不可能達(dá)到純單色光。還有光度計(jì)的整體設(shè)計(jì)問題，光度計(jì)不可能沒有其它的雜光存在。其三：用戶的溶液也不可能是純凈的，也會(huì)含有一些雜質(zhì)，這些對(duì)光度的吸收都會(huì)存在影響。除以上三個(gè)方面的影響外，在實(shí)際的光度計(jì)應(yīng)用過程中還會(huì)存在其他因素的影響，例如：

　　1、經(jīng)過比色皿的光是否垂直；

　　2、比色皿寬度是否為10mm的標(biāo)準(zhǔn)值；

　　3、測(cè)試波長(zhǎng)是否準(zhǔn)確；

　　4、程序設(shè)計(jì)是否存在漏洞等等，都會(huì)直接影響到利用瑯伯-比爾定律計(jì)算出的結(jié)果。

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