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凱式定氮儀方法如何估計(jì)食物中的蛋白質(zhì)

來(lái)源：上海靳瀾儀器制造有限公司 2024年10月10日 08:26 36

食物的蛋白質(zhì)含量可通過(guò)多種方法確定，用于蛋白質(zhì)分析的凱氏定氮法和氮燃燒法基于氮測(cè)定，這兩種方法都是用于食品營(yíng)養(yǎng)標(biāo)簽的目的，雖然凱氏定氮法已被廣泛使用了一百多年，但最近在許多情況下使用氮燃燒法方法的自動(dòng)化儀器正在取代凱氏定氮法的使用。

凱式定氮儀程序測(cè)量樣品的氮含量，然后可以假設(shè)所分析的特定食物的蛋白質(zhì)與氮的比率，來(lái)計(jì)算蛋白質(zhì)含量，凱氏法程序基本上可分為三個(gè)部分消化，蒸餾，滴定。在消化步驟中，有機(jī)氮在催化劑存在下在約370攝氏度轉(zhuǎn)化為銨。在蒸餾步驟中，用NaOH將消化的樣品堿化，并以NH3蒸餾出氮?dú)?。該NH3被捕獲在硼酸溶液中。通過(guò)用標(biāo)準(zhǔn)HCl溶液滴定，來(lái)量化該溶液中氨氮的量，通過(guò)分析進(jìn)行試劑空白，并從每次測(cè)定中減去該空白所需的HCl滴定劑的體積。

一、消化

打開(kāi)消化塊并加熱到適當(dāng)?shù)臏囟?，?zhǔn)確稱重約0.1克玉米粉，記錄重量，將玉米粉放入消化管中，重復(fù)兩個(gè)樣本。用玉米粉向每個(gè)管中加入一種催化劑片劑和適當(dāng)體積的濃硫酸。樣品中使用的一個(gè)催化劑片劑+體積的硫酸+稱重紙。將消化管架放在消化塊上，蓋上消化塊，打開(kāi)排氣系統(tǒng)，讓樣品消化直至消化完成，樣品應(yīng)清晰，沒(méi)有燒焦的材料。從消化塊中取出樣品，并在排氣系統(tǒng)仍然打開(kāi)的情況下冷卻。用適量的dd水小心稀釋消化液。旋轉(zhuǎn)每個(gè)管。

二、蒸餾

按照適當(dāng)?shù)某绦騿?dòng)蒸餾系統(tǒng)，將適量的硼酸溶液分配到接收瓶中，將接收瓶放在蒸餾系統(tǒng)上，確保來(lái)自樣品蒸餾的管子浸沒(méi)在硼酸溶液中，將樣品管放置到位，確保其牢固就位，然后進(jìn)行蒸餾直至完成，在該蒸餾過(guò)程中，將一定體積的NaOH溶液輸送到管中，蒸汽發(fā)生器將樣品蒸餾一段時(shí)間，完成一個(gè)樣品的蒸餾后，繼續(xù)使用新的樣品管并接收燒瓶，完成所有樣品的蒸餾后，按照制造商的說(shuō)明關(guān)閉蒸餾裝置。

三、滴定

如果使用自動(dòng)pH計(jì)滴定系統(tǒng)，按照制造商的說(shuō)明校準(zhǔn)儀器，將磁力攪拌棒放入接收瓶中，并將其放在攪拌盤(pán)上，滴定時(shí)保持溶液快速攪拌，但不要讓攪拌棒碰到電極，滴定每個(gè)樣品并空白至終點(diǎn)pH為4，記錄使用的HCl滴定劑的體積，如果使用比色終點(diǎn)，將磁力攪拌棒放入接收瓶中，將其置于攪拌板上，并在滴定時(shí)保持溶液劇烈攪拌，滴定每個(gè)樣品并用標(biāo)準(zhǔn)化的HCl溶液空白至個(gè)微弱的灰色。記錄使用的HCl滴定劑的體積。

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