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什么是PCR儀以及反應(yīng)目的和步驟

來(lái)源：上海靳瀾儀器制造有限公司   2024年10月07日 08:13   37
      PCR儀也稱為熱循環(huán)儀，是一種DNA放大器，通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)調(diào)節(jié)溫度，并擴(kuò)增DNA片段。有時(shí)也用于促進(jìn)酶消化或快速診斷的反應(yīng)。將保持反應(yīng)混合物的管插入PCR儀內(nèi)的熱塊中，機(jī)器以不連續(xù)的步驟升高和降低塊的溫度。PCR儀器通常循環(huán)4到99攝氏度，一些PCR儀器包含多個(gè)熱塊，可以同時(shí)進(jìn)行多個(gè)PCR反應(yīng)，以下將介紹PCR的目的，代表，循環(huán)及步驟。
 
    1、PCR的目的
    PCR的目的是擴(kuò)增少量感興趣的DNA序列，以便可以單獨(dú)分析，PCR可用于制備大量特定的DNA片段或測(cè)試DNA樣品序列。當(dāng)需要制備大量單個(gè)基因時(shí)，例如用于基因工程或克隆，PCR用于研究，還用于測(cè)試樣品中是否存在特定的基因產(chǎn)物。在法醫(yī)學(xué)中，PCR技術(shù)用于進(jìn)行DNA指紋分析，以分析現(xiàn)場(chǎng)的DNA證據(jù)，還可以用于醫(yī)療環(huán)境中以進(jìn)行的組織分型。
 
    2、PCR代表什么
    生物學(xué)中的PCR代表聚合酶鏈反應(yīng)，它指的是增加或放大少量DNA，以進(jìn)行更精確數(shù)據(jù)分析的過(guò)程。聚合酶鏈反應(yīng)具有幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)，一個(gè)是它便宜，這種DNA擴(kuò)增過(guò)程可以在短時(shí)間內(nèi)完成，非常適合正在緊急時(shí)間線工作的研究人員。PCR可以早期診斷惡性疾病，例如白血病和淋巴瘤。與聚合酶鏈反應(yīng)相關(guān)的一些缺點(diǎn)包括易于出錯(cuò)和可能突變?yōu)槟０錎NA。
 
    3、什么是PCR循環(huán)
    聚合酶鏈反應(yīng)循環(huán)是三步過(guò)程，包括變性，退火和延伸。該循環(huán)用于從DNA拷貝擴(kuò)增特定基因，它被用于法醫(yī)學(xué)中以隔離現(xiàn)場(chǎng)的血液，以確定期間是否存在。循環(huán)的步是變性，加熱并分離DNA鏈。第二步是退火，用于將引物和聚合酶連接到DNA鏈上，第三步是伸長(zhǎng)，在每個(gè)引物后不斷添加堿基以合成新的DNA鏈。該循環(huán)中的步驟重復(fù)多達(dá)35次，以產(chǎn)生大量DNA樣品。盡管在變性之前存在初始化步驟，并且在伸長(zhǎng)之后存在伸長(zhǎng)步驟，但是在循環(huán)期間不重復(fù)這些步驟。
 
    4、PCR的步驟
    聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)由三個(gè)步驟組成，DNA變性，引物退火和延伸。這些步驟重復(fù)20至35次，以合成正確數(shù)量的目標(biāo)DNA，這些步驟中的每一步都需要不同的溫度范圍，這允許PCR機(jī)器控制步驟，PCR通常在含有用于DNA合成的小PCR反應(yīng)管中進(jìn)行。

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