下面來(lái)介紹幾種常見(jiàn)的國(guó)產(chǎn)分光光度計(jì):
(一)721型分光光度計(jì)
這是一種采用光電管為受光器的較可見(jiàn)光分光光度計(jì)。由穩(wěn)壓電源供電的光源燈發(fā)出穩(wěn)定的白光。光線經(jīng)反射鏡投入狹縫,再經(jīng)準(zhǔn)直鏡反射進(jìn)入棱鏡,在棱鏡中發(fā)生色散后,光線經(jīng)鋁面反射后,其中一部分經(jīng)原路返回,并穿過(guò)狹縫,透過(guò)反射鏡進(jìn)入吸收杯。從吸收杯射出的光線再經(jīng)光門(mén)射到光電管上,產(chǎn)生相應(yīng)的電流,并經(jīng)電流表指示出相應(yīng)的刻度值。
其中色散棱鏡裝在一個(gè)可以轉(zhuǎn)動(dòng)的圓盤(pán)上,旋轉(zhuǎn)波長(zhǎng)選擇鈕可使之發(fā)生偏轉(zhuǎn),使不同波長(zhǎng)的光線通過(guò)狹縫形成一定波長(zhǎng)的單色平行光線。同時(shí),波長(zhǎng)盤(pán)也隨之轉(zhuǎn)動(dòng)以指示波長(zhǎng)數(shù)字。此型分光光度計(jì)給出360-800nm范圍的波長(zhǎng),在410-710nm之間靈敏、適用。使用方法如下。
1.靈敏度選擇鈕放在“1”檔(如調(diào)不到“0”時(shí),再選用較高的檔)。
2.轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)選擇鈕,選用所需的波長(zhǎng)。
3.接通電源(指示燈亮)。
4.揭開(kāi)比色皿暗箱蓋,轉(zhuǎn)動(dòng)“0”位鈕,使電表指針對(duì)準(zhǔn)T=0處。
5.將比色杯杯放入比色杯架上,使空白管對(duì)向光路,蓋好比色皿暗箱蓋,轉(zhuǎn)動(dòng)“百位鈕”調(diào)準(zhǔn)電表指針使之指向A=0(T=100處)。
6. 拉動(dòng)比色皿座的拉桿,使測(cè)定杯進(jìn)入光路,迅速?gòu)碾姳砩献x出吸光度值,記錄。測(cè)讀過(guò)程中,隨時(shí)將拉桿推回到原位,使空白杯進(jìn)入光路,并轉(zhuǎn)動(dòng)“百位鈕”,使指針回到A=0處。
7.比色完畢后,關(guān)上電源開(kāi)關(guān),取出比色杯,將比色皿暗箱蓋蓋好,清洗比色皿并空干。
8.注意事項(xiàng)
?、?光電比色計(jì)屬精密儀器,應(yīng)精心愛(ài)護(hù)使用,要防震、防潮、防腐蝕。
?、?比色杯的好壞對(duì)吸光度讀數(shù)的影響很大,要保持比色杯的清潔干凈,保護(hù)光學(xué)面的透明度,不能手握光學(xué)面,也不能用粗糙的物體接觸光學(xué)面,比色杯中的液體應(yīng)適量,不應(yīng)過(guò)滿,比色杯外壁的液體應(yīng)用擦鏡紙擦干,以防腐蝕儀器和影響讀數(shù)。如比色液為強(qiáng)酸強(qiáng)堿,應(yīng)盡快比色,以防破壞比色杯。
?、?比色時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以防光電系統(tǒng)疲勞。如需連續(xù)使用,中間應(yīng)適當(dāng)暫停使用,使之避光休息。
(二)UV-754型分光光度計(jì)
這是一種可供在紫外到紅外區(qū)(200-1000nm)測(cè)量吸收光譜的較分光光度計(jì)。此儀器的光學(xué)部分與721型分光光度計(jì)相類似,但它采用石英棱鏡作單色光器,有鎢絲燈和氫弧燈兩種光源。754型分光光度計(jì)的電學(xué)部分較為復(fù)雜。光電流經(jīng)過(guò)放大線路加以放大后,得到的樣品信號(hào)變?yōu)榕c透光率成比例的值。其后,調(diào)零、變換對(duì)數(shù)、濃度計(jì)算、打印數(shù)據(jù)等均由微處理機(jī)進(jìn)行。儀器的使用方法
1、測(cè)試準(zhǔn)備
?、糯蜷_(kāi)電源開(kāi)關(guān)之前,檢查一下試樣室是否放置遮光物。
?、圃嚇硬壑?ldquo;參考”位置。
?、墙与娫撮_(kāi)關(guān)(如果波長(zhǎng)工作在于200-360nm 時(shí)需按氘燈觸發(fā)按鈕)。
?、蕊@示器顯示754后,繼而顯示為100.0,則表示儀器已通過(guò)自檢程序。
?、蓛x器預(yù)熱三十分鐘后開(kāi)始測(cè)試。
2、測(cè)試
?、艛?shù)顯為100.0后,穩(wěn)定2-3秒鐘,即可把試樣槽置“樣品”位置進(jìn)行測(cè)試。待*個(gè)數(shù)據(jù)打印完畢后,再可將試樣槽置第二個(gè)“樣品”位置測(cè)試。
?、飘?dāng)需要調(diào)換波長(zhǎng)時(shí),必須把試樣槽置“參考”位置,重新調(diào)滿度。