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發(fā)酵罐的正確使用與清洗
一、正確使用發(fā)酵罐
發(fā)酵罐滅菌之后,就可以用來培養(yǎng)細菌了。
1.接上pH電極的插頭, 接通底部冷卻水管和空氣出口處的冷凝器上的冷卻水管, 將各硅酮管置于相應(yīng)的蠕動泵上。
2.把攪拌馬達置于攪抖聯(lián)動裝置上。
3.把光標調(diào)到“Temperature”檔,設(shè)定一個合適的溫度。
4.校正溶氧電極的滿刻度。
1)利用光標將攪拌速度調(diào)至大轉(zhuǎn)速,一般為800 r/min,把通氣量調(diào)節(jié)到1.0 L Air/L medium/min(1VVM)。
2)調(diào)到calibration界面,光標調(diào)至溶氧處,“span”檔,設(shè)定讀數(shù)為100,反復(fù)調(diào)節(jié)幾次,直至穩(wěn)定至100,轉(zhuǎn)至menu界面。
5.其他參數(shù)設(shè)定。把光標調(diào)到Agit檔,設(shè)定小值為200 r/min。把光標調(diào)到DO檔,設(shè)定參數(shù)為合適的值, 調(diào)整為與溶氧偶聯(lián)檢測。把光標調(diào)到Agit檔,設(shè)定大值為800 r/min;把光標調(diào)到pH檔,設(shè)定參數(shù)為7.0,調(diào)整為自動檢測;接上酸(堿)瓶,并打開自動檢測系統(tǒng)。
6.接種:發(fā)酵罐的接種就是將蘸滿乙醇的棉花球纏在接種口外套上, 點燃火焰以前將接種口的蓋子旋松。然后點燃發(fā)酵罐上的棉花球, 取掉蓋子, 立即在火焰中加入各組分培養(yǎng)基和種子液。然后將蓋子浸泡在乙醇中, 接種后, 用攝子將蓋子準確放回原位, 旋緊。
7.打開記錄實驗過程的專用軟件。
8.發(fā)酵過程中,每隔兩小時記錄溶氧、轉(zhuǎn)速、測定OD600,取樣品5 mL儲存進行各種分析檢測。
認真的對照上面的步奏進行,發(fā)酵缸的操作就順利完成了。
二、發(fā)酵罐的清洗的注意事項
發(fā)酵罐的清洗是非常重要的,但是很多人不太會,不但沒有清洗干凈,反而可能導(dǎo)致更惡劣的后果。
1.發(fā)酵過程會產(chǎn)生大量的蛋白質(zhì)、酒花樹脂、多糖、酵母等有機物和草酸鈣、硫酸鹽等無機物,在發(fā)酵罐清空后,有機物和無機物污物附著在罐壁上,呈黃褐色。酒石數(shù)量多時,表面呈現(xiàn)白色,如同鹽堿地表皮一樣,無機物與有機物相互交織在一起。
清洗時使用火堿,只是對去除有機物有作用,清洗溫度達到80℃以上,才會有較好的清洗效果。
清洗時采用單一的硝酸進行清洗,只是對無機物有一定效果,對有機物幾乎無效。而發(fā)酵罐壁所結(jié)污物為無機物和有機物的混合物,使用單一清洗劑清洗困難。因此,有的啤酒廠每年都會對發(fā)酵罐進行一次大清洗,*清刷發(fā)酵罐。
2.發(fā)酵罐壁T541防腐層部分損壞,經(jīng)修補后,表面光潔度明顯下降,造成罐壁污物清洗困難。
3.洗罐器或洗球的磨損或堵塞,導(dǎo)致部分發(fā)酵罐清洗不*,污物積累較多。
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