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【詳細(xì)說明】

兩性化合物的分離策略。如果分子在pH高于其等電點 時穩(wěn)定,可使用陰離子交換樹脂。如果分子在pH低于 其等電點時穩(wěn)定,則使用陽離子交換樹脂。

 

層析根據(jù)化合物的凈電荷進(jìn)行分離。帶負(fù)電荷或 正電荷的官能團(tuán)共價結(jié)合于固相載體基質(zhì),分別成為陽離子交 換劑和陰劑。當(dāng)一個帶電荷的分子加入到帶有相反電 荷的交換劑時,它就會被吸附,同時,帶相同電荷的離子和中 性分子則被洗脫到層析柱的外水體積里。帶電荷分子的結(jié)合是 可逆的,通??捎名}或pH 梯度洗脫被吸附的分子。我們提供多 種不同顆粒大小、離子形式和純度范圍的介質(zhì)。

載體選擇

等電點— 根據(jù)待分離化合物的特性選擇載體。對于兩性化合物來說,分子的等電點(pI)和它在不同pH 值下的穩(wěn)定性決定了分離策略。pH 高于pI ,目標(biāo)化合物將帶負(fù)電荷,而當(dāng)pH 低于pI 時,化合物則帶正電荷。 因此,如果化合物在高于pI 的pH 下穩(wěn)定,應(yīng)該使用陰載體。相反,如果化合物在低于pI 的條件下穩(wěn)定, 則應(yīng)該使用陽載體。工作pH 值也決定了所要使用的交換劑的類型。一個強(qiáng)載體在很大的pH 跨 度范圍內(nèi)仍能維持其功能,而弱載體當(dāng)pH 值與其官能團(tuán)的pKa 差距較大時就會失去功能。

離子形式— 許多介質(zhì)具有多種離子形式,而且可以從一種轉(zhuǎn)變成另一種。載體的離子形式是指目前被樹 脂官能團(tuán)吸附的反荷離子。每種載體對不同反荷離子均有著特定的選擇度。載體對反荷離子的選擇度越低,與另一 個帶相同電荷的離子的交換就越容易。因此,適當(dāng)?shù)碾x子形式將取決于被吸收樣品離子的相對選擇度。一般來說, 該離子形式對于官能團(tuán)的選擇度應(yīng)該較樣品離子低,這樣樣品離子才能將反荷離子置換從而被載體吸附。可以通過 加入第二種對載體具有更高選擇度的反荷離子來洗脫樣品離子。

孔性— 一種載體的孔性是指載體基質(zhì)內(nèi)的總的孔容量。孔容量越大,孔性越高。一個孔性很高的載體可能有很多 小孔或只有幾個大孔。載體的排阻極限由特定條件下可通過孔的zui大分子決定。排阻極限高的多孔介質(zhì)推薦用于分 離大分子量的分子,如蛋白、抗體和其他生物分子。排阻極限低的低孔性或高孔性介質(zhì)推薦用于分離小分子量的分子, 如無機(jī)離子和有機(jī)酸等。高孔性介質(zhì)包括Macro–Prep, Bio–Gel, 和Bio–Rex 70。低孔性介質(zhì)包括AG 和Chelex 樹 脂。

顆粒大小— 顆粒的大小以微米計,有干膠顆粒度或濕膠顆粒度兩種命名方式。由于不同離子形式的樹脂顆粒的水合 狀況存在差異,其濕顆粒直徑也會有所不同。較小的顆粒能提供更高的分辨率,但通常要求較低的工作流速;較大的 顆??色@得的分辨率較低,但能在較高流速下運行。

層析可以有多種應(yīng)用,包括分離和純化生物分子,分離無機(jī)離子,試劑和水的去離子化,鹽轉(zhuǎn)換以及 去除金屬離子、溴化乙錠和SDS。

    
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