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技術(shù)文章

改良Weigert彈力纖維染色液使用說明書

閱讀:1317          發(fā)布時(shí)間:2020-3-25

改良Weigert彈力纖維染色液

【產(chǎn)品組成】

試劑(A):Weigert氧化劑

A1:Weigert氧化劑A

25ml

室溫

A2:Weigert氧化劑B

25ml

室溫

臨用前,取A1、A2等量混合即為Weigert氧化劑,不宜提前配制。

試劑(B):Weigert漂白劑

50ml

室溫

試劑(C):Weigert*品紅染色液

50ml

室溫,避光

試劑(D):酸性分化液

50ml

室溫

試劑(E):改良VG染色液

E1:麗春紅S溶液

5ml

室溫,避光

E2:PA溶液

45ml

室溫,避光

臨用前,按E1:E2=1:9混合即為VG染色液,不宜提前配制。

【保存條件】

    室溫,避光,12個(gè)月

【產(chǎn)品概述】

    彈力纖維(Elastic Fiber)主要分布于人體的動(dòng)脈壁、肺泡壁、皮膚,新鮮時(shí)呈黃色,折光性強(qiáng)。常用的彈力纖維染色法有Gomori醛品紅法、*堿性品紅法、地衣紅法、維多利亞藍(lán)法、鐵dian蘇木素法等。*堿性品紅染色液主要用于彈力纖維染色,又稱Weigert樹脂酚復(fù)紅染色液。Van Gieson膠原纖維染色法的染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)。PA分子量小,麗春紅和復(fù)紅次之,淡綠分子量大。VG染色后,肌纖維呈黃色,膠原纖維呈紅色。彈力纖維染色可以顯示皮膚組織中彈力纖維的變化,如彈力纖維痣、皮膚環(huán)狀肉芽腫、硬度病等;顯示與判定心內(nèi)膜及動(dòng)脈的病變,觀察某些病變中是擊伴有彈力纖維的增生或破壞;還可鑒別腫瘤組織成分如彈力纖維瘤,經(jīng)彈力纖維染色后,可清晰見到瘤體內(nèi)彈力纖維球。

    改良Weigert彈力纖維染色液染色原理在于*品紅與鐵離子形成Lake復(fù)合物,其游離的氨基與彈力纖維內(nèi)的氫鍵牢固結(jié)合呈黑色。較常規(guī)Weigert*品紅彈力纖維染色多了氧化和漂白過程,適用于顯示各種彈力纖維,比傳統(tǒng)的Weigert*品紅法更清晰、不易脫色、保存時(shí)間長。

【使用方法】

1、組織固定于10%的福爾馬林中,常規(guī)脫水包埋。

2、切片厚4μm,常規(guī)脫蠟至水。

3、用配制好的Weigert氧化劑氧化5min。

4、稍水洗。

5、用Weigert漂白劑漂白1~2min。

6、流水沖洗2min。

7、95%的乙醇稍洗。

8、切片入裝有Weigert*品紅染色液的染色缸(加蓋)中,室溫下染色1~3h。

9、用酸性分化液分化至無染液脫下,約2~3s。

10、流水沖洗10min。

11、VG染色液復(fù)染30s。

12、急速用水洗一下,立刻用95%的乙醇快速分化和脫水。

13、常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固。

【染色結(jié)果】

彈力纖維

藍(lán)色至紫黑色

膠原纖維

紅色

肌纖維和紅細(xì)胞

黃色

【注意事項(xiàng)】

1、如僅顯示成熟的彈性纖維,可省上述去氧化和漂白步驟。

2、酸性分化液主要使切片背景清晰,分化稍長一些對(duì)染色無損害。

3、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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