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生產(chǎn)的種子制備

內(nèi)的生產(chǎn)菌種按其在深層培養(yǎng)中菌絲的形態(tài)分為絲狀菌和球狀菌兩類。絲狀菌根據(jù)孢子顏色又分為黃孢子絲狀菌和綠孢子絲狀菌，目前生產(chǎn)上用的菌種是產(chǎn)黃青霉菌（penicilium chrysogenum）的變種-綠色絲狀菌。

球狀菌根據(jù)其孢子顏色不同，分為綠孢子球狀菌和白孢子球狀菌，目前生產(chǎn)上多用白孢子球狀菌。不同菌種對(duì)原材料、培養(yǎng)條件有定差別，生產(chǎn)能力存在較大差異。

球狀菌的生產(chǎn)工藝流程如下所示：

沙士管保藏菌種母瓶斜面大米孢子種子罐繁殖罐

發(fā)酵罐絲狀菌的生產(chǎn)工藝流程如下所示：

冷凍管親米生產(chǎn)米種子罐發(fā)酵罐將沙土管的孢子接入拉氏培養(yǎng)基的母瓶斜面，25℃培養(yǎng)6~7d，長(zhǎng)成綠色孢子。孢子懸浮液接入裝有大米的茄子瓶?jī)?nèi)，25℃，相對(duì)濕度40%~45%，培養(yǎng)6~7d，制成大米孢子，真空干燥，保存?zhèn)溆谩?/p>

生產(chǎn)時(shí)按定量接入種子罐內(nèi)，25℃，通氣量為1：2.0m3-（m3-min）-1，培養(yǎng)40~45h，菌絲濃度達(dá)40%（體積分?jǐn)?shù)）以上，菌絲形態(tài)正常。1%~5%的接種量接入繁殖罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)25℃，通氣量為1：1.5m3（m3-min）-1，培養(yǎng)13~15h，菌絲體積40%以上，殘?zhí)窃?.1%左右，無(wú)菌檢查合格便可作為發(fā)酵罐的種子。

冷凍管孢子接入在混有0.5%~1.0%玉米漿的大米上培養(yǎng)得到原始親米孢子，然后再移入培養(yǎng)瓶培養(yǎng)成熟得到大米孢子（又稱生產(chǎn)米），親米和生產(chǎn)米均為25℃靜置培養(yǎng)。經(jīng)常觀察生長(zhǎng)情況，在培養(yǎng)3~4h后，大米表面長(zhǎng)出明顯小集落時(shí)振蕩搖勻，使菌絲在大米表面能均勻生長(zhǎng)，待10d左右形成綠色孢子即可收獲。親米成熟后接入生產(chǎn)米后經(jīng)過(guò)激烈振蕩后放置恒溫培養(yǎng)，生產(chǎn)米的孢子量要求每粒米300萬(wàn)孢子以上，親米、生產(chǎn)米孢子保存在5℃冰箱內(nèi)。

工藝要求將新鮮的生產(chǎn)米（指收獲后的孢子在10d以內(nèi)使用），接入含有花生餅粉、玉米胚芽粉、葡萄糖、飴糖的種子罐內(nèi)，28℃，通氣量為1：1.5m3-（m3-min）-1，培養(yǎng)5~6h，ph由6.0~6.5下降到5.0~5.5，菌絲呈菊花團(tuán)狀，平均直徑在100~130um，菌球濃度為（6~8）×104個(gè)-mL-1，沉降率在85%以上，計(jì)算接入的體積，移入發(fā)酵罐。球狀菌以新鮮孢子為佳，其生產(chǎn)水平優(yōu)于真空干燥的孢子，能使發(fā)酵單位的批次差異減少。