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技術(shù)文章

發(fā)酵過(guò)程溶解氧濃度的變化及其控制

閱讀:524          發(fā)布時(shí)間:2022-11-14

發(fā)酵過(guò)程溶解氧濃度的變化及其控制


在發(fā)酵過(guò)程中,在定的發(fā)酵條件下,每種產(chǎn)物發(fā)酵的溶解氧濃度變化都有自身的規(guī)律。通常,溶解氧濃度變化分三個(gè)階段。在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,DO值下降明顯,從其下降的速率可大致估計(jì)菌的生長(zhǎng)情況;至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末期,會(huì)出現(xiàn)溶解氧低谷;在發(fā)酵后期,由于菌體衰老,呼吸強(qiáng)度減弱,溶解氧濃度也會(huì)逐步上升,旦菌體自溶,溶解氧濃度上升會(huì)更明顯。

發(fā)酵過(guò)程溶解氧濃度的變化及其控制

對(duì)和生產(chǎn)來(lái)說(shuō),在發(fā)酵前期,產(chǎn)生菌大量繁殖,需氧量不斷增加,使溶解氧濃度迅速下降,出現(xiàn)低峰,而在這個(gè)時(shí)期,產(chǎn)生菌的攝氧率同時(shí)出現(xiàn)高峰,菌體濃度和黏度般也在此時(shí)出現(xiàn)高峰;過(guò)了生長(zhǎng)階段,進(jìn)入產(chǎn)物合成期,需氧量有所減少,這個(gè)階段的溶解氧水平相對(duì)比較穩(wěn)定。

隨菌種的活力、接種量以及培養(yǎng)基的不同,DO值在培養(yǎng)初期開(kāi)始明顯下降的時(shí)間也不同。對(duì)發(fā)酵來(lái)說(shuō),大約在發(fā)酵的10~20h出現(xiàn)溶解氧的低峰;而抗生素的溶解氧低峰在10~70h。發(fā)酵過(guò)程中,DO值低谷到來(lái)的遲早與低谷時(shí)的DO水平還會(huì)隨工藝和設(shè)備條件(如發(fā)酵過(guò)程中補(bǔ)料、加消泡劑等操作工藝)的不同而異。在合成期補(bǔ)糖后,產(chǎn)物合成期發(fā)酵液的攝氧率就會(huì)增加,引起溶解氧濃度下降,經(jīng)過(guò)段時(shí)間后又逐步回升并接近原來(lái)的溶解氧濃度;如繼續(xù)補(bǔ)糖,又會(huì)繼續(xù)下降,甚至降至臨界氧濃度以下,而成為生產(chǎn)的限制因素。出現(xiàn)二次生長(zhǎng)時(shí),DO值往往會(huì)從低谷處逐漸上升,到定高度后又開(kāi)始下降-這是微生物開(kāi)始利用第二種基質(zhì)(通常為遲效碳源)的表現(xiàn)。

在發(fā)酵過(guò)程中,有時(shí)會(huì)出現(xiàn)溶解氧濃度明顯降低或明顯升高的異常變化。其原因很多,但本質(zhì)上都是由耗氧或供氧方面出現(xiàn)了變化所引起的氧的供需不平衡所致。

在發(fā)酵過(guò)程中溶解氧異常下降可能有下列原因:①污染好氧雜菌,大量的溶解氧被消耗掉,使溶解氧在較短時(shí)間內(nèi)下降到零附近;②菌體代謝發(fā)生異?,F(xiàn)象,需氧要求增加,使溶解氧下降;③影響供氧的設(shè)備或工藝控制發(fā)生故障或變化,也能引起溶解氧下降,如攪拌功率消耗變小或攪拌速率變慢,影響供氧能力,使溶解氧降低。引起溶解氧異常升高的原因主要是耗氧量的顯著減少將導(dǎo)致溶解氧異常升高,如污染烈性噬菌體,使生產(chǎn)菌呼吸受到抑制,溶解氧上升,當(dāng)菌體破裂后,失去呼吸能力,溶解氧直線(xiàn)上升。

發(fā)酵液中DO值的任何變化都是氧的供需不平衡的結(jié)果。也就是說(shuō),在發(fā)酵過(guò)程中當(dāng)供氧量大于耗氧量時(shí),溶解氧濃度就上升;反之就下降。因此,要控制好發(fā)酵液中的溶解氧濃度,需從供氧和耗氧這兩個(gè)方面著手。

供氧方面,由氧的傳遞速率方程O(píng)TR=KLa(c*-cL)可知,凡是能使KLa和C*增加的因素都能使發(fā)酵供氧得到改善。因此,主要是設(shè)法提高氧傳遞的推動(dòng)力和容積氧傳遞系數(shù)KLa。發(fā)酵液中氧的飽和濃度c*主要受溫度、罐壓及發(fā)酵液性質(zhì)的影響。而這些參數(shù)在優(yōu)化了的工藝條件下,已經(jīng)很難改變。因此,在實(shí)際生產(chǎn)中通常從提高氧的容積氧傳遞系數(shù)KL著手,提高設(shè)備的供氧能力。除增加通氣量外,般是改善攪拌條件。通過(guò)提高攪拌轉(zhuǎn)速或通氣流速、降低發(fā)酵液的黏度等來(lái)提高KLa值,從而提高供氧能力。改變攪拌器直徑或轉(zhuǎn)速可增加功率輸出,從而提高a值。另外,改變擋板的數(shù)目和位置,使攪拌時(shí)發(fā)酵液流態(tài)發(fā)生變化,也能提高a值。近年來(lái),通過(guò)加入傳氧中間介質(zhì)來(lái)提高生物應(yīng)用的傳氧系數(shù)的方法已引起了廣泛關(guān)注。傳氧中間介質(zhì)有血紅蛋白、石蠟等。

耗氧方面,發(fā)酵過(guò)程的耗氧量受菌體濃度、營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)的種類(lèi)與濃度、培養(yǎng)條件等因素影響,其中以菌體濃度的影響為明顯。通過(guò)營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)濃度來(lái)控制菌的比生長(zhǎng)速率,使其保持在比臨界氧濃度略高點(diǎn)的水平進(jìn)行發(fā)酵,達(dá)到適菌體濃度,這是控制適溶解氧濃度的重要方法。如發(fā)酵,就是通過(guò)控制補(bǔ)加葡萄糖的速率來(lái)控制菌體濃度,從而控制溶解氧濃度。

DO值只是發(fā)酵參數(shù)之,它對(duì)發(fā)酵過(guò)程的影響還必須與其他參數(shù)配合起來(lái)分析。內(nèi)外都有將DO值與尾氣中的氧氣、二氧化碳,ph以及補(bǔ)料起控制進(jìn)行發(fā)酵的成功例子。控制的原則是加糖速率應(yīng)正好使培養(yǎng)物處在半饑餓狀態(tài),即僅能維持菌的正常生理代謝的狀態(tài),而把更多的糖用于產(chǎn)物的合成,并且其攝氧率不至于超過(guò)設(shè)備的供氧能力。



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