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噬菌體對發(fā)酵的影響及污染的原因檢測
閱讀:677 發(fā)布時間:2022-11-14噬菌體對發(fā)酵的影響
噬菌體的感染力非常強,易感染用于發(fā)酵的細菌和放線菌。噬菌體感染的傳播蔓延速度非???,且很難防治,對發(fā)酵生產(chǎn)帶來巨大的威脅。發(fā)酵過程如果受噬菌體侵染,般會發(fā)生溶菌,隨之出現(xiàn)發(fā)酵遲緩或停止,而且受噬菌體感染后,往往會反復連續(xù)感染,使生產(chǎn)無法進行,甚至倒灌。
噬菌體感染的具體表現(xiàn)為:
①鏡檢可發(fā)現(xiàn)菌體數(shù)量明顯減少,菌體不規(guī)則,嚴重時看不到菌體,且是在短時間內(nèi)菌體自溶。發(fā)酵液光密度(OD值)不上升,甚至回降。
②發(fā)酵液ph值逐漸上升,4~8h內(nèi)可達8.0以上,不再下降。
③糖耗、溫升緩慢或停止,發(fā)酵液殘?zhí)橇扛?,產(chǎn)生大量泡沫,使發(fā)酵液呈黏膠狀。
④發(fā)酵周期延長,產(chǎn)物生成量甚少或增長緩慢,甚至停止。
產(chǎn)生噬菌體污染的原因
環(huán)境污染噬菌體是造成噬菌體感染的主要根源。通常在工廠投產(chǎn)初期并不會感覺到噬菌體的危害,經(jīng)過1~2年以后,主要是由于生產(chǎn)和試驗過程中不斷不加注意地把許多活菌體排放到周圍環(huán)境中去,自然界中的噬菌體就在活菌體中大量生長,為自然界中噬菌體快速增殖提供了良好條件。這些噬菌體隨著風沙塵土、空氣流動、人們的走動、車輛的往來到處傳播,使噬菌體有可能潛入生產(chǎn)的各個環(huán)節(jié),尤其是通過空氣系統(tǒng)進入種子室、種子罐、發(fā)酵罐。
噬菌體污染的檢測
要判斷發(fā)酵過程有無感染噬菌體,根本的方法是做噬菌斑檢驗。在無菌培養(yǎng)皿上倒入培養(yǎng)生產(chǎn)菌的滅菌培養(yǎng)基(加瓊脂)作下層。同樣地,培養(yǎng)基中加入20%~30%培養(yǎng)好的種子液,再加入待測發(fā)酵液,搖勻后,鋪上層。培養(yǎng)12~20h后觀察培養(yǎng)皿上是否出現(xiàn)噬菌斑。
也可以在上層培養(yǎng)基中只加種子液,而將待測發(fā)酵液直接點種在上層培養(yǎng)基表面,培養(yǎng)后觀察有無透明圈出現(xiàn)。