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噬菌體的防治措施

噬菌體的防治是項(xiàng)系統(tǒng)工程，涉及到發(fā)酵生產(chǎn)管理的方方面面。從菌種保藏、種子培養(yǎng)、培養(yǎng)基滅菌、無菌空氣制備、生產(chǎn)設(shè)備管理、檢測分析到環(huán)境衛(wèi)生等各個(gè)環(huán)節(jié)，必須規(guī)范操作，嚴(yán)格把關(guān)，才能有效地防治噬菌體的危害。應(yīng)嚴(yán)禁活菌體排放，切斷噬菌體的“根源"；做好環(huán)境衛(wèi)生，消滅噬菌體與雜菌；嚴(yán)防噬菌體與雜菌進(jìn)入種子罐或發(fā)酵罐內(nèi)；抑制罐內(nèi)噬菌體的生長；輪換使用菌種或使用抗性菌株。

1.定期檢查，及時(shí)消滅噬菌體

日常生產(chǎn)中要加強(qiáng)各環(huán)節(jié)噬菌體的檢測，以便早發(fā)現(xiàn)、早治理，防患于未然。在發(fā)酵過程中旦發(fā)現(xiàn)噬菌體的危害，應(yīng)立即對全廠各工序的空氣過濾系統(tǒng)、發(fā)酵液、排氣口、污水口以及周圍環(huán)境進(jìn)行取樣檢測，找出噬菌體較集中的地方，采取相應(yīng)的措施消滅噬菌體和雜菌。例如，對于種子室和搖床間，可采用甲醛熏蒸及紫外線處理的方法；對于常用工具、發(fā)酵罐體表面及墻壁地面，可采用新潔爾滅及石炭酸溶液噴霧或擦洗；對于發(fā)酵罐內(nèi)部及管道系統(tǒng)，則可采取蒸汽滅菌的方法。

2.加強(qiáng)管理，嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程

種子和發(fā)酵工段的操作人員要嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作規(guī)程，認(rèn)真進(jìn)行種子保管，不使用本身帶有噬菌體的菌種。不得將感染噬菌體的培養(yǎng)物帶入菌種室、搖瓶間。認(rèn)真進(jìn)行發(fā)酵罐、補(bǔ)料系統(tǒng)的滅菌。嚴(yán)格控制逃液、取樣分析和洗罐所廢棄的菌體。對倒罐、取樣分析所排放的廢液必須先滅菌后排放。

3選育抗噬菌體菌株和輪換使用

生產(chǎn)菌株選育抗噬菌體菌株是種有效的手段。所獲得的抗性菌株既要有較全面的抗性，又要能保持原有的生產(chǎn)能力。但有的菌種在選育中很難做到既有抗性又能保持原有的生產(chǎn)能力。目前比較實(shí)用的方法是輪換使用生產(chǎn)菌株。針對噬菌體對寄主侵染的專性，采用輪換使用生產(chǎn)菌株的方法，可有效防止噬菌體的蔓延和危害，保證生產(chǎn)的正常進(jìn)

4.噬菌體污染的應(yīng)急措施

發(fā)現(xiàn)了噬菌體污染時(shí)，先必須取樣檢查，并根據(jù)各種異?，F(xiàn)象做出正確的判斷，盡快采取相應(yīng)的挽救措施。常用的應(yīng)急方法有以下幾種：

①加入少量藥物，以阻止噬菌體繁殖。如加少量草酸及檸檬酸等合劑阻止噬菌體吸附；加些抗生素抑制噬菌體蛋白質(zhì)的合成及增殖，該法僅適用于耐藥的生產(chǎn)菌株，由于成本較高，無法在較大的發(fā)酵罐中使用。

②發(fā)酵過程中污染噬菌體時(shí)，可補(bǔ)入適量的新鮮培養(yǎng)基或生長因子（如玉米漿、酵母膏等），促進(jìn)生產(chǎn)菌生長，加快發(fā)酵速度，使發(fā)酵得以順利進(jìn)行。

③大量補(bǔ)接種子液或重新接種抗性菌種培養(yǎng)液，以便繼續(xù)發(fā)酵至終點(diǎn)，防止倒灌，盡可能減少損失。在補(bǔ)種之前也可對已感染噬菌體的發(fā)酵液進(jìn)行低溫滅菌處理。