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結(jié)構(gòu)光學(xué)成像系統(tǒng)

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ApoTome熒光影像雜光消除系統(tǒng)
有效消除較厚熒光樣本非焦面雜光，使影像澄清。
可做光學(xué)切片，3D重組。
On-line獲得澄清影像。
輕易切換傳統(tǒng)熒光及澄清化熒光擷取兩種模式。
適用于ZeissZ高階正立與倒立顯微鏡。

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ApoTome熒光影像雜光消除系統(tǒng)
有效消除較厚熒光樣本非焦面雜光，使影像澄清。
可做光學(xué)切片，3D重組。
On-line獲得澄清影像。
輕易切換傳統(tǒng)熒光及澄清化熒光擷取兩種模式。
適用于Zeisszui高階正立與倒立顯微鏡。
熒光標(biāo)定為研究細(xì)胞學(xué)與分子生物學(xué)十分重要及普遍的方法，然而傳統(tǒng)的顯微熒光擷取往往無(wú)法克服非焦距面雜光的干擾，導(dǎo)致影像模糊不清而無(wú)法獲取精確的信息。此現(xiàn)象尤其發(fā)生于以高倍率高解析力物鏡觀察較厚之熒光樣本時(shí)。因高倍率高解析力物鏡之景深較薄，僅約1um，但樣本之厚度往往大于1um，若落于景深范圍外（非焦距面）的熒光樣本所產(chǎn)生之雜光無(wú)法消除，不但會(huì)干擾焦距面熒光影像的觀察，且進(jìn)一步地阻礙后續(xù)3D影像重組與3D影像量測(cè)的進(jìn)行

目前較廣為人知的消除非焦距面雜光的方式有兩種：其一為共軛焦顯微鏡，以pinhole的控制阻擋非焦面雜光進(jìn)入影像擷取系統(tǒng)；其二為3D deconvolution，依點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù)（point spread function）原理，將已擷取之較模糊的熒光影像以軟件運(yùn)算方式處理，以獲得澄清化的影像。前者效能但十分昂貴，后者效能雖佳，但有軟件運(yùn)算費(fèi)時(shí)甚久，無(wú)法及時(shí)獲得影像之缺點(diǎn)。

?ApoTome為Zeiss于2002年底正式推出之熒光影像非焦面?”Apo”為*之光學(xué)，”Tome”為切片之意，ApoTome”即意指*之光學(xué)切片。
?此系統(tǒng)結(jié)合特殊硬件裝置與軟件運(yùn)算的方式，達(dá)到實(shí)時(shí)的澄清化熒光影像擷取。
?硬件方面包括一內(nèi)含光柵之滑板及其控制器，軟件則包含硬體的操控界面與擷取影像的運(yùn)算程序。

使用時(shí)將此光柵滑板推入熒光光路中視野光圈的位置，使光柵正確投影于樣本的焦距面，再以控制器控制三段光柵位置，以數(shù)字影像系統(tǒng)擷取三段光柵位置投影之影像后，立即經(jīng)軟件的運(yùn)算獲得消除非焦距面雜光之澄清化影像，光學(xué)切片厚度可達(dá)1 Airy，有助于后續(xù)3D影像重組與3D影像量測(cè)實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。

ApoTome可裝置于Zeiss*正立熒光顯微鏡Axio Imager D2、Z2及倒立熒光顯微鏡Axio Observer D1、Z1，方便現(xiàn)有之Zeiss顯微鏡升級(jí)?？墒褂脗鹘y(tǒng)熒光光源（汞燈或氙燈），不需使用昂貴的雷射燈管，研究者可以的成本獲得消除熒光影像非焦面雜光的功能。另由于軟件運(yùn)算時(shí)間大大地減少（130萬(wàn)畫(huà)素僅需約100ms），且不必要擷取Z軸堆棧影像即可做澄清化的運(yùn)算處理，研究者得以迅速判斷所擷取影像的樣本優(yōu)劣，并迅速?gòu)闹蝎@得更精確的信息，大為提升研究的效率。應(yīng)用領(lǐng)域廣及細(xì)胞生物學(xué)、神經(jīng)學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、分子病理學(xué)、分子遺傳學(xué)等。相關(guān)之熒光標(biāo)定實(shí)驗(yàn)方法如蛋白質(zhì)免疫熒光標(biāo)定，染色體熒光原位雜交，自發(fā)性熒光蛋白質(zhì)標(biāo)定等研究，皆可應(yīng)用ApoTome而獲得澄清化的熒光影像擷取與更精確的判讀。