發(fā)酵罐中PH傳感器的正確使用
⑵ 滅菌 校準(zhǔn)以后,應(yīng)該將傳感器插入到發(fā)酵罐中并進(jìn)行密封。在發(fā)酵罐滅菌時(shí),一般將PH計(jì)的連接物移開(采用高壓滅菌鍋滅菌時(shí)),滅菌后重新連接,PH傳感器開始工作。也有實(shí)驗(yàn)操作人員用酒精對PH傳感器單獨(dú)消毒(即不放入滅菌鍋),主要是為了延長傳感器的使用壽命。然后需將傳感器立即插入且密封在罐內(nèi)。必須指出,這一過程可能染菌。盡管有些報(bào)道稱在研究中規(guī)則地使用這一步驟沒有問題。具體方法如下:放好傳感器,加上一個(gè)合適的配件以使PH探頭易于由發(fā)酵罐頂盤進(jìn)行安裝,然后將其在*中至少放置lh。探頭和配件必須是很干凈的,探頭的浸沒位置應(yīng)高于配件。后應(yīng)迅速地將傳感器轉(zhuǎn)移到預(yù)先滅好菌的發(fā)酵罐中,其已與空氣供應(yīng)系統(tǒng)相連,而且其中的空氣已開始流動(dòng)。
⑶ 校準(zhǔn)的檢查 在滅菌或使用過程中,很可能會(huì)使校準(zhǔn)發(fā)生偏移。對于狀況良好的傳感器,這種偏移不會(huì)超過0.2個(gè)單位。但一些研究人員仍建議在發(fā)酵罐滅菌以后進(jìn)行校準(zhǔn)或者再校準(zhǔn)。目前已有適用于較大發(fā)酵罐的這種系統(tǒng),可以*無菌地取出傳感器,再將其部分地插入校準(zhǔn)緩沖液中進(jìn)行校準(zhǔn)。在實(shí)驗(yàn)室規(guī)模下,有必要將傳感器*移出,利用前述的化學(xué)處理方法來進(jìn)行再消毒。在實(shí)驗(yàn)室中檢查一個(gè)可疑校準(zhǔn)的較好方法是對發(fā)酵液進(jìn)行無菌取樣,在發(fā)酵罐外測量其PH值盡快進(jìn)行檢測、讀數(shù)。因?yàn)榧?xì)胞在不斷變化的條件下(例如在連續(xù)培養(yǎng)中氧和基質(zhì)的消耗)進(jìn)行連續(xù)代謝,如果培養(yǎng)基的緩沖性能較差,PH在幾分鐘內(nèi)即可發(fā)生顯著變化,從而無法正確檢查傳感器的校準(zhǔn)。