GIBCO G418抗生素GENETICIN，GIBCO G418抗生素GENETICIN，
G418（G-418即G-418 sulfate，也稱Geneticin，分子式為C20H40N4O10.2H2SO4，分子量為692.71 g/mole）是一種氨基糖類抗生素，其結(jié)構(gòu)與*、*、*相似，它通過(guò)影響80S核糖體功能而阻斷蛋白質(zhì)合成,對(duì)原核和真核等細(xì)胞都有毒性 ,包括細(xì)菌、酵母、植物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞 ,也包括原生動(dòng)物和蠕蟲(chóng)。是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染zui常用的選擇試劑。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞基因組合適的地方后 ,則能啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá) ,使細(xì)胞獲得抗性而能在含有Ｇ418的選擇性培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。Ｇ418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等方面得以廣泛應(yīng)用。
G418和篩選
篩選之前由于每種細(xì)胞對(duì)G418的敏感性不同，而且不同的廠家生產(chǎn)的相同濃度的G418的活性不盡相同，所以在篩選之前，一定要確定G418的zuijia篩選濃度。具體如下：將細(xì)胞稀釋到1000個(gè)細(xì)胞/mL，在100ug/mL~1mg/mL的G418濃度范圍內(nèi)進(jìn)行篩選，選擇出在10~14天內(nèi)使細(xì)胞全部死亡的zui低G418濃度來(lái)進(jìn)行下一步的篩選試驗(yàn)。
由于每種細(xì)胞對(duì)G418的敏感性不同，一般變動(dòng)在100ug/ml～1000ug/ml范圍。而且不同的廠家生產(chǎn)的相同濃度的G418的活性不盡相同，所以在篩選之前，一定要確定你的細(xì)胞對(duì)這一批G418的篩選濃度。盡管如此，特性明確的細(xì)胞系G418的zuijia用量還是穩(wěn)定的。《分子克隆》給出了幾個(gè)常用細(xì)胞系所需G418的zuijia用量 ：
細(xì)胞系或機(jī)體 | G418濃度（ug/ml） |
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 | 700～800 |
Madin-Darby犬腎細(xì)胞 | 500 |
人上皮A431細(xì)胞 | 400 |
猿CV-1細(xì)胞 | 500 |
盤(pán)基網(wǎng)柄菌屬 | 10～35 |
植物 | 10 |
酵母 | 125～500 |
訂購(gòu)信息：
| 貨號(hào) | 單位規(guī)格 | 規(guī)格 | 數(shù)量 | |
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| 11811023也被稱為 11811-023 | 1 g | 1 | ||
| 11811031也被稱為 11811-031 | 5 g | 1 | ||
| 11811098也被稱為 11811-098 | 25 g | 1 |
