貨號：74004 痕量樣品總RNA提取試劑盒 (50)
英文名稱：RNeasy Micro Kit (50)
中文名稱：痕量樣品總RNA提取試劑盒 (50)
品 牌：Qiagen
貨 號：74004
74004 痕量樣品總RNA提取試劑盒 從細胞或組織樣本中純化至多45 μg的總RNA
數分鐘內快速純化得到高品質總RNA
即用型RNA在各種下游應用中表現良好
微量起始樣本， RNA產量穩(wěn)定
無需酚/抽提
無需CsCl梯度離心，無需LiCl或乙醇沉淀
RNeasy Micro Kit于從微量細胞和組織樣本中純化至多45 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent方便的穩(wěn)定組織樣本，使用TissueRuptor或TissueLyser體系高效破碎樣本。可在QIAcube全自動核酸分析儀上應用RNeasy Micro Kit實現RNA純化全自動化。處理更大的樣本，可使用RNeasy Mini Kit（離心柱結合能力為100 µg RNA）、RNeasy Midi Kit（離心柱結合能力為1 mg RNA）或RNeasy Maxi Kit（離心柱結合能力為6 mg）。 特點 | 參數 |
應用 | PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray |
洗脫體積 | 10–14 µl |
規(guī)格 | Spin column |
主要樣本類型 | Tissue, cells |
處理 | Manual |
純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | RNA |
樣本量 | <5 mg |
技術 | Silica technology |
每次運行或制備時間 | 30–40 minutes |
產量 | Varies |
性能
RNeasy Micro Kit可從微量樣本中得到高產量總RNA，且重復性好。從少量細胞，包括單細胞以及微量標準組織樣本中都能純化得到總RNA（參見Reliable RNA isolation from a single cell、Highly reproducible yields for sensitive applications和High-quality total RNA from fine needle aspirates）。RNeasy Micro Kit通過高效的柱上基因組DNA消化可使珍貴的樣本在定量基因表達分析中得到zui大的敏感度，如real-time RT-PCR（參見Efficient on-column removal of genomic DNA）。
原理
RNeasy Micro Kit于從微量樣本中純化總RNA，如顯微切割組織、細針穿刺樣本、微量纖維組織包括心臟和肌肉組織、微量細胞、甚至是單細胞（如FACS篩選細胞）。處理顯微切割FFPE組織，我們*使用RNeasy FFPE Kit。RNeasy技術整合了*/異硫氰酸胍裂解的嚴謹性和硅膠膜純化的速度和純度，簡化了總RNA的純化技術。RNeasy MinElute離心柱*的設計可確保zui小的洗脫體積，小至10 µl，實現RNA的高度濃縮。小洗脫體積意味著下游的反應可控制在小體積范圍內，提高反應效率。高純度確保全部樣本可用于反轉錄等下游應用，無酶抑制。
操作流程
RNeasy Micro Kit于從微量樣本中純化總RNA。先對樣本（<5 mg組織或<5 x 105個細胞）進行破碎和勻漿。在裂解物中加入乙醇以提供合適的結合條件。然后將裂解物上樣至RNeasy MinElute離心柱，RNA（至多45 µg）結合到硅膠膜上。RNeasy Micro Kit包含RNase-free DNase，確保簡單、高效的柱上基因組DNA消化，適用于敏感的應用。DNase和其他污染物被高效洗去后，10–14 µl水洗脫得到高濃度的純化RNA。
應用
RNeasy Micro Kit純化得到小洗脫體積（10 µl）RNA，重復性好，適用于敏感的定量基因表達分析，包括以單細胞為起始樣本的real-time RT-PCR。
