菌落總數(shù)測(cè)試片
菌落總數(shù)的快速測(cè)定方法 適用范圍:可用于各類食品及原料中菌落總數(shù)的測(cè)定。也可用于與食品接觸的容器、操作臺(tái)和其他設(shè)備表面的衛(wèi)生檢測(cè)。
菌落總數(shù)的快速測(cè)定方法
1 適用范圍 : 可用于各類食品及原料中菌落總數(shù)的測(cè)定 。 也可用于與食品接觸的容器 、 操作臺(tái)和其他設(shè)備表
面的衛(wèi)生檢測(cè)。
2 方法原理:將營養(yǎng)培養(yǎng)基、凝膠和氯化三苯基四氮唑( TTC )顯色劑等加載在試紙片,經(jīng)加樣、培養(yǎng)后,
細(xì)菌菌落在測(cè)試片上顯現(xiàn)出紅色菌斑,通過計(jì)數(shù)報(bào)告結(jié)果。
3 操作方法
3.1 樣品處理 : 無菌稱取樣品 25g ( 或 25mL ) 放入含有 225mL 無菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi) , 經(jīng)充分
振搖 ( 均質(zhì) ) 做成 1:10 的稀釋液 。 用 1mL 滅菌吸管吸取 1:10 稀釋液 1mL , 注入含有 9mL 滅菌生理鹽水的試
管內(nèi) , 用 1mL 滅菌吸管反復(fù)吸吹制成 1:100 的稀釋液 。 以此類推 , 做出 1:1000 等稀釋度的稀釋液 , 每個(gè)稀釋
度更換一支滅菌吸管。
3.2 接種:一般食品選 2 ~ 3 個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè),含菌量少的液體樣品(如食用純水和礦泉水等)可直接用
原液檢測(cè) 。 將測(cè)試片放在水平臺(tái)面上 , 揭開上面的透明薄膜 , 用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液 1mL , 均勻
加到中央的紙片上,輕輕將上蓋膜放下,靜置 5 min 使培養(yǎng)基凝固,zui后用手輕輕地壓一下。每個(gè)稀釋度接
種兩片。
3.3 培養(yǎng) : 將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中 , 透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi) , 堆疊片數(shù)不超過 12 片 。
培養(yǎng)溫度為 36 ℃± 1 ℃ ,培養(yǎng) 15 ~ 24h 。
4 結(jié)果判斷與計(jì)數(shù):
4.1 細(xì)菌在紙片上生長(zhǎng)后會(huì)顯示紅色斑點(diǎn) , 選擇菌落數(shù)適中 ( 10 個(gè)~ 100 個(gè) ) 的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù) , 乘以稀釋倍
數(shù)后即為每克(或毫升)樣品中所含的細(xì)菌菌落總數(shù)。菌落數(shù)在 100 以內(nèi)時(shí),按實(shí)有數(shù)報(bào)告。大于 100 時(shí) ,
用二位有效數(shù)字,二位有效數(shù)字后面的數(shù)字,以四舍五入方法計(jì)算,并以 10 的指數(shù)來表示。
4.2 計(jì)數(shù)原則與報(bào)告方式
4.2.1 通常選擇菌落在 10 個(gè)~ 100 個(gè)之間的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù),乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見下表中例次 1 ) 。國家
標(biāo)準(zhǔn)菌落總數(shù)報(bào)告方式術(shù)語為 cfu/g 或 mL , cfu 的含義為菌落形成單位。
4.2.2 若有兩個(gè)稀釋度的菌落數(shù)在 10 個(gè)~ 100 個(gè)之內(nèi),兩者的比值小于 2 ,則取其平均數(shù),若大于 2 ,則采
用稀釋度小者報(bào)告。
4.2.3 若三個(gè)稀釋度的菌落數(shù)都有在 10 個(gè)~ 100 個(gè)之內(nèi)時(shí),應(yīng)選擇二個(gè)低數(shù)值的平均數(shù)。
4.2.4 若三個(gè)稀釋度的菌落數(shù)均小于 10 個(gè)或大于 100 個(gè)時(shí) , 應(yīng)重新試用更低或更高的稀釋度進(jìn)行菌落計(jì)數(shù) ;
或采用均小于數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)的zui小值,或采用均大于數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)的zui大值。
5 表面取樣方法 : 加 1mL 滅菌生理鹽水在測(cè)試片上 , 靜置至少 1h 使培養(yǎng)基凝固 ; 提起上層膜 , 使中央濾紙
部分貼到待測(cè)物表面,用手在外側(cè)輕壓;然后將上蓋膜合上,置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。
6 注意事項(xiàng):使用過的紙片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
:李菲 :