程：
黃曲霉毒素B1（AFB1）酶聯(lián)免疫定量檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明
本測(cè)試盒用間接競(jìng)爭(zhēng)免疫分析法定量測(cè)定谷物中AFB1。該測(cè)試盒反應(yīng)孔可拆卸，可測(cè)單份樣品，也可測(cè)多份樣品。定量分析時(shí)需有含450nm波長(zhǎng)的微孔板酶標(biāo)儀。
1 概要
黃曲霉毒素是由曲霉菌屬的黃曲霉和寄生曲霉等產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，主要污染玉米、花生、堅(jiān)果等。天然污染的黃曲霉毒素以AFB1為主，AFB1屬于強(qiáng)烈致癌物質(zhì)，肝臟是其主要的靶器官，具有*的急性毒性和致癌性。
AFB1檢測(cè)方法主要有薄層色譜法（TLC）、高效液相色譜法（HPLC）和ELISA方法，本試劑盒是以應(yīng)用單克隆抗體為基礎(chǔ)的ELISA檢測(cè)方法，可以準(zhǔn)確快速檢測(cè)糧谷類(lèi)和花生及飼料中的AFB1。
2 測(cè)定原理
本試劑盒采用固相酶聯(lián)免疫吸附原理，利用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法進(jìn)行測(cè)定。用抗原包被微孔板，加入AFB1標(biāo)準(zhǔn)品或樣品、抗AFB1單克隆抗體進(jìn)行孵育后，將未與包被抗原結(jié)合的抗體洗去；再加入酶標(biāo)記的抗鼠IgG抗體孵育，加入顯色液，經(jīng)過(guò)終止液終止后，用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)定OD值。
3 提供的物品
----微孔板…………………………………………………………… 包被有AFB1-BSA
----5個(gè)濃度的AFB1標(biāo)準(zhǔn)溶液（各0.5mL）
標(biāo)準(zhǔn)1：0ng/mL…………………………………………………………….直接使用
標(biāo)準(zhǔn)2：0.1ng/m…………………………………………………………….直接使用
標(biāo)準(zhǔn)3：0.2ng/mL ………………………………………………………….直接使用
標(biāo)準(zhǔn)4：0.5ng/m………………………………………………….…………直接使用
標(biāo)準(zhǔn)5：1.0ng/m………………………………………….…………………直接使用
----抗AF B1單克隆抗體溶液（6mL）……………………………………………直接使用
----酶標(biāo)物（12mL）..………………………………………………………………直接使用
----顯色液（12mL）..………………………………………………………………直接使用
----終止液（6mL）…………………………………………………………………直接使用
----濃縮洗液（30mL）..……………………………………………………………稀釋使用
4 盒中未提供，需自備物品
----微孔板酶標(biāo)儀（可于450nm處測(cè)定）、振蕩器、粉碎機(jī)、微量移液器
----量筒、漏斗、容量瓶、快速定性濾紙
----氯化鈉（分析純）、甲醇（分析純）、去離子水或蒸餾水
5 操作者注意事項(xiàng)
----標(biāo)準(zhǔn)溶液中含有黃曲霉毒素，應(yīng)特別小心。
----使用過(guò)的玻璃容器及黃曲霉毒素溶液用pH7的次氯酸溶液（10%v/v）浸泡過(guò)夜。
----終止液含有l(wèi)iu酸，避免接觸皮膚。
----每次加樣后立即將所有試劑放回2~
----每步加樣時(shí)間應(yīng)控制在5min內(nèi)。
----孵育過(guò)程中應(yīng)避光。
----不要使用過(guò)期試劑盒。
----不要交叉使用不同批號(hào)的試劑盒中的試劑。
6 儲(chǔ)存條件
----保存試劑盒于2~
----顯色液對(duì)光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
----將不用的微孔板放進(jìn)原鋁箔袋中，置2~
7 試劑變質(zhì)的標(biāo)志
----標(biāo)準(zhǔn)1的吸光度值小于0.5個(gè)單位（A450nm<0.5）時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。
8 樣品處理
----樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存。
----取
----強(qiáng)力振蕩3分鐘。
----用快速定性濾紙過(guò)濾。
----取1mL濾液，加水4mL進(jìn)行稀釋。
----取50μL稀釋液進(jìn)行分析。
----*根據(jù)需要可以增減樣品量，但甲醇-水溶液的量也應(yīng)相應(yīng)增減。
